膽道閉鎖(biliary atresia，BA)是?以肝內(nèi)外膽道系統(tǒng)進(jìn)行性炎癥及纖維化閉鎖持續(xù)進(jìn)展為主要病理特征，造成嚴(yán)重的膽汁淤積和膽汁性肝硬化的肝膽疾病。BA晚期可出現(xiàn)門靜脈高壓和肝衰竭，患兒如未能得到及時(shí)救治多在1~2年內(nèi)死亡，是嬰幼兒時(shí)期最常見的導(dǎo)致死亡的肝膽疾病，也是小兒肝移植最常見的適應(yīng)證。BA的發(fā)病率為0.55-1.3/10000名活嬰，中國上海地區(qū)膽道閉鎖發(fā)病率為10.86/10000名活嬰，遠(yuǎn)高于歐美國家。Kasai 手術(shù)是 BA 治療的首選方式。BA患兒預(yù)后與手術(shù)時(shí)年齡密切相關(guān)，早期診斷和及早進(jìn)行Kasai手術(shù)能夠顯著改善此病預(yù)后，減少肝移植。然而，由于臨床、生化、影像學(xué)和組織病理學(xué)特征相似，在疾病早期識別BA與其他嬰兒膽汁淤積癥仍然具有挑戰(zhàn)性，導(dǎo)致BA患兒Kasai手術(shù)時(shí)年齡偏大，預(yù)后較差。

隨著質(zhì)譜技術(shù)的進(jìn)一步普及和代謝組學(xué)的快速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)膽汁酸代謝改變與肝損傷和膽汁淤積密切相關(guān)，而特定的膽汁酸可能是區(qū)分BA可靠的生物標(biāo)志物。

一、特定膽汁酸與BA診斷

除BA外，Alagille綜合征，Caroli綜合征和家族性膽汁淤積綜合征(PFIC)等疾病也會導(dǎo)致患兒產(chǎn)生膽汁淤積的癥狀。對于BA患兒，往往早期認(rèn)識不足，沒有進(jìn)行合理的檢查和診斷，給予相應(yīng)的治療和建議，多數(shù)情況下按照新生兒肝炎綜合征或母乳性黃疸進(jìn)行保守治療，而治療效果不佳時(shí)，才想起來是否為外科性黃疸引起的膽道進(jìn)行性梗阻，這時(shí)多數(shù)患兒已失去最佳的治療時(shí)機(jī)。2018年的一項(xiàng)研究結(jié)果顯示，BA患兒和膽道淤積的非BA患兒膽汁酸存在顯著差異，BA患兒血清甘氨鵝脫氧膽酸(GCDCA)和牛磺鵝脫氧膽酸(TCDCA)的含量顯著高于膽道淤積的非BA患兒。根據(jù)ROC曲線，當(dāng)GCDCA切值為30μM時(shí)，其在BA診斷中的敏感性為100%，特異性為83.3%，陽性預(yù)測值為88.9%，陰性預(yù)測值為100%，可有效識別BA患兒和膽道淤積的非BA患兒。

其中，在高危組中，評分> 35 分的 BA 估計(jì)風(fēng)險(xiǎn)為 > 95.5%，驗(yàn)證隊(duì)列中得分較高的所有患者最終被診斷為 BA。該評分系統(tǒng)為臨床提供了一種無創(chuàng)診斷方法來鑒別嬰兒BA和膽汁淤積。

此外，新生兒肝炎綜合征（NHS）是新生兒膽汁淤積的另一個(gè)主要原因，通常會與BA診斷混淆，但兩者的膽汁酸亞型有顯著差異。與NHS患者相比，BA患者TCDCA水平更高，CDCA水平更低。BA患者的TCDCA/CDCA升高，可用于區(qū)分BA和NHS患者，其ROC曲線下面積為0.923。

BA患兒有特定的膽汁酸模式，通過定量檢測特定膽汁酸的含量并結(jié)合相關(guān)的算法，可有助于準(zhǔn)確、快速和非侵入性的BA診斷。

二、膽汁酸譜與Kasai手術(shù)預(yù)后

嬰兒發(fā)生膽道閉鎖后需接受Kasai手術(shù)，若術(shù)后患兒高膽紅素水平持續(xù)升高則需進(jìn)行肝移植，但術(shù)后膽紅素水平正常也不意味著就有好的預(yù)后，臨床上仍缺乏精準(zhǔn)的預(yù)測指標(biāo)。今年的一項(xiàng)前瞻性研究結(jié)果顯示，血清總膽汁酸水平與Kasai術(shù)后膽紅素水平正常的嬰兒預(yù)后情況相關(guān)。該研究入組Kasai術(shù)后六個(gè)月、總膽紅素水平正常的患兒，共收集血清樣本137例并進(jìn)行膽汁酸水平檢測，根據(jù)膽汁酸水平將患兒分為低BA組(BA ≤ 40 μmol / L, n = 43)和高BA組(BA > 40 μmol / L, n = 94)，并進(jìn)行隨訪。在隨訪期間發(fā)現(xiàn)低BA組的患兒發(fā)生脾腫大、腹水、胃腸道出血或門靜脈高壓癥的可能性降低。低BA組肝移植/死亡的10年累積發(fā)生率為8.5%，顯著低于高BA組的42.9%。因此，對于Kasai術(shù)后膽紅素水平正常的嬰兒，可檢測血清膽汁酸水平，預(yù)測其預(yù)后情況，及時(shí)干預(yù)。

綜上所述，檢測BA患兒血清膽汁酸，尋找診斷BA的敏感指標(biāo)，可為早期識別BA提供新的方法和方向，幫助臨床醫(yī)生實(shí)現(xiàn)BA的早診斷，早手術(shù)，以降低肝移植概率。另外，術(shù)后膽汁酸檢測，也預(yù)測Kasai術(shù)后膽紅素正常患兒的預(yù)后情況！

三、方法學(xué)優(yōu)勢（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）

1、前處理僅需蛋白沉淀，簡單快速，適用于全自動樣本處理平臺，有利于提高處理通量。

2、檢測指標(biāo)更全面，僅需50μL血清，可同時(shí)檢測17種膽汁酸，對體內(nèi)膽汁酸評估更全面。

3、膽汁酸同分異構(gòu)體分離效果更好，膽汁酸定量結(jié)果更準(zhǔn)確。

四、膽汁酸譜檢測試劑產(chǎn)品

檢測試劑盒

樣本釋放劑（膽汁酸蛋白沉淀法） 

滬閔械備20190076 號

檢測指標(biāo)

膽酸(CA)

熊脫氧膽酸(UDCA)

鵝脫氧膽酸(CDCA)

石膽酸(LCA)

脫氧膽酸(DCA)

牛磺膽酸(TCA)

牛磺脫氧膽酸(TDCA)

牛磺石膽酸(TLCA)

牛磺熊脫氧膽酸(TUDCA)

牛磺鵝脫氧膽酸(TCDCA)

甘氨膽酸(GCA)

甘氨石膽酸(GLCA)

甘氨脫氧膽酸(GDCA)

甘氨熊脫氧膽酸(GUDCA)

甘氨鵝脫氧膽酸(GCDCA)

甘氨豬去氧膽酸(GHDCA)

牛磺豬去氧膽酸(THDCA)

樣本類型

血清

試劑規(guī)格

96測試/盒

目前，上海睿康生物科技有限公司已基于LC-MS/MS平臺開發(fā)出17種膽汁酸的檢測試劑盒，可檢測常見的初級膽汁酸和次級膽汁酸，助力于BA的無創(chuàng)診斷與預(yù)后監(jiān)測！

參考文獻(xiàn)：

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